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從培養(yǎng)的塔瑪亞歷山大藻中提取N-氨基磺酰基甲狀腺素-2和-3，并化學轉化為GTX2和GTX3混合物，使用制備規(guī)模色譜法進行純化[2]。將純化的GTX2&3在真空下干燥并溶解在過濾的0.5mM HCI水溶液中以得到儲備溶液。通過500 MHz質子核磁共振（NMR）光譜、LC-ox-FLD[3]（Figure 1）、LC-MSIMS[4]（Figure 2和Figure 3）、毛細管電泳紫外檢測（CE-UVD）[5]和液相色譜化學發(fā)光氮檢測（LC-CLND）[6]檢查毒素的純度。

在過濾（0.2 um）中制備CRM-GTX2和3-d溶液，并在pH 3.4下脫氣0.5 mM HCl，并將其分配到預先填充氬氣的琥珀安瓿中，然后立即火焰密封。每個安瓿含有約0.5 mL溶液。

NRC標準品 CRM-GTX2&3漆溝藻毒素同質性

從整個灌裝系列中選擇了代表性數(shù)量的CRM-GTX283-d安瓿，并通過LC-ox-FLD測量GTX2&3濃度。使用ANOVA評估數(shù)據(jù)。

NRC標準品 CRM-GTX2&3漆溝藻毒素穩(wěn)定性

研究表明，GTX2和3溶液儲存在+4°C的密封安瓿中，具有良好的長期穩(wěn)定性，在一年內未觀察到任何可檢測到的分解。溶液在冰箱（-12℃或更低）中儲存時也很穩(wěn)定。已確定GTX2&3在室溫下具有良好的穩(wěn)定性，在分析方法的不確定度范圍內一個月內未觀察到任何可檢測到的分解（LC-MS，單一溶液重復注射的RSD<1%；n=6）。

NRC標準品 CRM-GTX2&3漆溝藻毒素不確定性

考慮并量化了與CRM-GTX283-d表征相關的所有合理誤差源。包括與所使用的兩種分析方法相關的組合不確定度分量（Lehar）?？傮w不確定度估算（UcRw）包括與批次表征（uchar）、儲存期間不穩(wěn)定性（usab）和瓶間變化（usom）相關的不確定度[8-11]。表3列出了這些組件，并按如下方式組合和擴展：